[实验11]观察蝗虫精原细胞减数分裂的装片
1 实验的准备工作
此实验的难度比较大,因此,实验前教师必须准备5台示范镜,分别演示减数第1次分裂中期、后期,减数第2次分裂中期、后期和精细胞,并逐个绘出简图。对学生实验用的装片,应逐一检查,尽量挑选细胞分裂明显、染色体清晰的装片,并在标签上做上记号。
2 实验的安排
学生实验开始之前,教师讲解区别减数第1次分裂和第2次分裂时期细胞的方法,以及绘图的要求。在学生观察自己的装片过程中,教师要安排学生轮流观察示范镜。绘制简图最好安排在实验课上,并要求学生绘制镜下物像,以培养学生实事求是的科学态度。
3 实验成功的关键及注意事项
实验成功的关键是掌握镜下区别两次分裂时期细胞的方法。另外还应加强对学生的个别指导。注意事项:学生使用的装片,尽量挑选质量好的片子;观察顺序必须先低倍镜观察,后高倍镜观察;必须充分利用示范镜的演示效果。
4 观察结果的记录
通过绘制简图,将观察到的细胞分裂的几个时期的特点记录下来,练习左眼观察右眼绘图的方法。
[实验12]DNA的粗提取与鉴定
1 实验的准备工作
1.1 购买活鸡
按2人1组进行实验,每班(50人)至少应购买4只体重1.5～2kg的活鸡。
1.2 准备药品
配制大量的2mol/LNaCl溶液(配方:取NaCl117g,加蒸馏水至1000ml,使之完全溶解),少量的甲基绿溶液(配方:取甲基绿粉末1g,溶于99ml蒸馏水中,再加1ml冰醋酸,盛于试剂瓶中)。预冷95%的酒精(至少24h,5℃以下)。配制10%柠檬酸钠溶液。
1.3 制备鸡血细胞液
有条件的学校可用离心机离心,没有条件的学校可在冰箱内放置1天,自行沉淀。
1.4 准备塑料烧杯和试管,可以减少提取过程中DNA的损失。
2 实验的安排
此实验的难度较大,实验开始之前,教师必须讲清实验原理、操作步骤及方法要求,操作流程可采用图解式,使学生一目了然(见下列图解)。实验过程中,每组的2个学生必须紧密配合,分工合作,才能于课内如期完成实验。
3 实验成功的关键及注意事项
实验成功的关键是,能否提取到较纯净的DNA丝状物。为此,操作过程中应注意如下几点:
3.1 血细胞液加水以后,必须充分搅拌,不应少于5min,否则血细胞核不会充分破碎,释放出的DNA就会减少。过滤时采用单层纱布。
3.2 当NaCl溶液加入到血细胞滤液中之后,必须充分晃动烧杯,使二者混合均匀。这样可以加速核蛋白解聚,游离出DNA,并使DNA充分溶解于浓NaCl溶液中。
3.3 “析出DNA”的步骤中,必须充分加水,才能稀释NaCl溶液,使DNA溶解度变小,蛋白质溶解度增大,二者分离。同时,应用玻璃棒不停地缓缓搅动,使DNA聚集(玻璃有吸附DNA的作用)。如果在此步骤中,再增加离心或过滤(多层纱布过滤),则可得较粘稠的丝状物(含DNA)。
3.4 在“析出的DNA再溶解”的步骤中,加入浓NaCl溶液之后,必须充分搅拌,使DNA充分溶解。
3.5 用冷酒精浓缩和沉淀DNA时,所用的95%酒精必须经过充分预冷后才能使用。二者的体积比为1∶2,即将1份含DNA的NaCl溶液加入到2份的冷酒精中。卷起DNA丝状物的方法是,缓缓旋转玻璃棒。如果用冷酒精处理后,悬浮于溶液中的丝状物较少,可将混合液放入冰箱中再冷却几分钟,然后再用玻璃棒卷起丝状物。
3.6 染色时应注意,当用甲基绿溶液过染2min后,必须用水充分冲洗,洗净浮色。
4 实验现象的观察
注意洁净丝状物的颜色和粘稠性。如有条件,可用商品DNA作对比观察。
[探究1]制作DNA双螺旋结构模型
1 实验的准备工作
按学生人数备足制作DNA模型所需的各种零件。
2 实验的安排
预习DNA双螺旋结构的特点;熟悉教师提供的不同材料所代表的DNA分子的结构;2人合作,共同制作模型。
3 制作模型的注意事项
3.1 按顺序制作模型
3.1.1 制作单核苷酸(脱氧核苷酸)模型。
3.1.2 按实验指导规定的碱基顺序,制作1条多核苷酸长链模型。再按碱基互补原则制作另1条多核苷酸长链模型。
3.1.3 制作DNA分子平面结构模型,连接好2条长链之间的“碱基对”。
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